附睾尾的采集与低温运输

材料和设备

1. 雄性小鼠（12周龄以上）
2. 精细（眼科）剪刀
3. 一副5#钟表镊子
4. 伤口夹（Autoclip 9mm；Clay Adams 427631）和夹钉（Mik-Ron Autoclip Applier; Clay Adams 427630）
5. 温度数据记录仪（Thermochron iButton Cat.No.DS1921G; Maxim Integrated Products）
6. 保存液 (COSMO BIO)
7. CARD低温的运输套装 (COSMO BIO)
   • Thermos保温瓶 (Cat.No.JMK-501; Thermos K.K.)
   • 纸盒 (0.2mL冷冻管能直立)
   • 药棉
   • 冰袋 (small and large)
   • 聚苯乙烯泡沫输送箱(KARUX KC-3)

无论是CARD的低温运输包还是保存液，在使用前必须预冷至4-8℃。

程序

附睾尾的采集

1. 雄性小鼠麻醉。
   
   
2. 在小鼠阴囊上做一个小的手术切口，排/拉出附睾尾部。
   
   
   
   
   
   
3. 切断输精管和附睾，采集附睾尾部。
   
   
   
   
   
   
   [采集附睾尾]
   
   
   
   
   [从麻醉的雄鼠中取出一个附睾尾]
   
   
   
   
4. 将睾丸放回腹腔，用创口夹闭合伤口。
   
   
5. 将小鼠放在37℃ 的保温板上保温，直到小鼠从麻醉效果中恢复过来。
   

   备注:	手术后1周，雄鼠可与雌鼠交配。

   
   

附睾尾的包装与运输

包装附睾的物品在使用前应冷却并保持在4-8℃ 。此外，包装程序应尽快完成，以防止附睾尾和包装物升温。

1. 将取出的附睾放入含有保存液的0.2ml离心管内。
   
   
   




2. 将装有附睾的离心管、温度数据记录器和一块药棉放在纸盒里。
   
   
   



3. 将装有附睾尾的纸盒放入保温瓶内。
   
   
   
   
   
   
4. 把两个冰袋（小）放进保温瓶里。
   
   
   
   
   
   
5. 拧上瓶盖。
   
   
   
   
   
   
   
6. 在泡沫运输箱底部放一个冰袋（大），然后把保温瓶放在上面。
   
   
7. 在瓶子上面两侧各放一个冰袋（大），然后在这上面和泡沫盖之间放置一个更大的冰袋（大）。
   

   注意:	注意不要把纸盒倒置。

   注意:	由于热水瓶的长度与泡沫输送箱的内长相同，所以只能将热水瓶放在泡沫输送箱的中心而不是实际的底部。这是为了在运输过程中保护保温瓶。

   
   
8. 用包装胶带密封泡沫运输箱的盖子。
   
   
   
   
   
   
9. 把泡沫运输箱放在冰箱里直到快递员来取。
   
   
10. 通过正规的快递服务公司寄送样品。

    注意:	样品必须在冷藏温度下传送。请随时直接向快递公司询问运输过程中的情况。

    备注:	附睾精子在低温下保持受精能力可长达72小时。

更新记录

1. 更新 : 1 May, 2018